高效液相色譜儀(HPLC)是在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,其以液體作為流動相,并采用顆粒非常細的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。其分離機制與常規(guī)柱色譜相同,但填料更加精細,需高壓泵推動,柱效高,分析速度快。
高效液相色譜法的應(yīng)用范圍十分廣泛,對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定。經(jīng)過30多年的迅速發(fā)展,高效液相色譜法在基礎(chǔ)理論、儀器裝置和色譜柱等方面的研究已趨于成熟,現(xiàn)已成為化學(xué)化工、環(huán)境、藥學(xué)、食品等多個領(lǐng)域中非常具優(yōu)勢的分離分析方法之一。
高效液相色譜儀的主要性能有以下幾點:
高壓——壓力可達150~300 kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。
高速——流速為0.1~10.0 mL/min。
高效——塔板數(shù)可達5000/米。在一根柱中同時分離成份可達100種。
高靈敏度——紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。
HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點:
速度快——通常分析一個樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。
分辨率高——可選擇固定相和流動相以達到更佳分離效果。
靈敏度高——紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學(xué)檢測器可達0.1pg。
這里引申說明一下,一臺品質(zhì)較好的高效液相色譜儀應(yīng)從主要技術(shù)指標(主要是分析樣品的穩(wěn)定性),系統(tǒng)操作的便利性,整套系統(tǒng)統(tǒng)一性這三個方面進行評估。