液質(zhì)聯(lián)用儀實(shí)現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢(shì)的互補(bǔ),將色譜對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力與質(zhì)譜的高選擇性、高靈敏度結(jié)合起來(lái)。在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。
儀器污染是液質(zhì)聯(lián)用儀在日常工作中會(huì)遇到的常見(jiàn)問(wèn)題。但只要做好預(yù)防工作,就可以有效降低液質(zhì)聯(lián)用儀出現(xiàn)污染問(wèn)題的概率。本文將從溶劑處理、實(shí)驗(yàn)器材清洗等方面介紹預(yù)防污染的措施。
1、請(qǐng)正確選擇、制備和處理溶劑:
有機(jī)溶劑必須為色譜純及以上級(jí)別,推薦使用進(jìn)口品牌試劑。
注意:)有機(jī)溶劑請(qǐng)注意制造商建議的有效期,打開(kāi)溶劑瓶可能會(huì)發(fā)生污染;2)水或緩沖鹽溶液要使用超純水(18.2 M?)。
水溶性流動(dòng)相和水易受微生物生長(zhǎng)的影響,可能會(huì)在梯度運(yùn)行中形成峰,并在等度運(yùn)行中增加背景吸收。為防止流動(dòng)相中生長(zhǎng)微生物,請(qǐng)每天制備且過(guò)濾含水流動(dòng)相并進(jìn)行脫氣。
為減少背景噪音,請(qǐng)使用Z低濃度的流動(dòng)相添加劑。使用的添加劑越多,引入流動(dòng)相的污染就會(huì)越多。
請(qǐng)使用色譜純級(jí)別以上的添加劑。同時(shí),請(qǐng)使用含低濃度鐵離子和其他金屬離子的添加劑,例如:甲酸。請(qǐng)注意切勿使用可能含有大量金屬離子的乙酸。最后請(qǐng)注意,不可使用非揮發(fā)性的添加劑等。
溶劑應(yīng)儲(chǔ)存于潔凈的玻璃器皿中,并蓋上溶劑瓶以防止通過(guò)空氣傳播的污染物進(jìn)入溶劑。封蓋溶劑瓶時(shí),請(qǐng)使用鋁箔或者系統(tǒng)隨附的蓋子。
注意:請(qǐng)勿使用Parafilm或其他塑料薄膜覆蓋溶劑瓶。
2、請(qǐng)正確清洗實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿:
使用前必須徹底清洗用于制備或儲(chǔ)存流動(dòng)相的玻璃器皿。切勿使用去污劑或洗潔精清洗玻璃器皿。請(qǐng)先用有機(jī)溶劑沖洗玻璃器皿,再用水沖洗。
如果需要進(jìn)行更徹底的清洗,可按照以下步驟操作:
依次使用10%甲酸、純水、甲醇或乙腈進(jìn)行超聲處理,最后再用水進(jìn)行超聲處理;
再次重復(fù)此操作兩次;
將用于制備或儲(chǔ)存流動(dòng)相的玻璃器皿與其他常用的玻璃器皿分開(kāi)存放。
3、請(qǐng)正確制備和處理樣品:
請(qǐng)確保樣品無(wú)顆粒。同時(shí),在制備和處理樣品的過(guò)程中必須注意不要引入污染。請(qǐng)使用潔凈的樣品瓶、瓶蓋和樣品板。推薦使用沃特世的進(jìn)樣小瓶。
4、請(qǐng)佩戴手套:
請(qǐng)佩戴無(wú)顆粒物、無(wú)粉塵的非乳膠手套。如果手套變濕,應(yīng)予以更換。濕手套會(huì)帶入污染。
5、請(qǐng)使用潔凈的色譜柱:
UPLC或HPLC色譜柱可以捕獲色譜柱頭上的顆粒物、沉淀的蛋白質(zhì)以及其他有機(jī)污染物。這些污染物會(huì)增加操作壓力或改變色譜柱選擇性,從而對(duì)色譜柱的壽命產(chǎn)生不良影響。此外,污染物可能緩慢排出,使殘留和背景噪音增加。
色譜柱還會(huì)聚集溶劑中的雜質(zhì)。這種情況會(huì)在以下條件下發(fā)生:
使用含水量較高的溶劑對(duì)反相色譜柱(例如C18色譜柱)進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間平衡;
使用有機(jī)試劑濃度較低的溶劑在反相色譜柱上執(zhí)行等度運(yùn)行。
吸收的化合物可能會(huì)洗脫為顯著的峰或成為延伸在整個(gè)色譜圖上的大寬峰。痕量成分的富集效果會(huì)增加溶劑或UPLC/HPLC系統(tǒng)中的污染物含量。
存儲(chǔ)色譜柱時(shí),請(qǐng)?jiān)谥惺褂米畛跆峁┑娜軇?例如100%乙腈)進(jìn)行存儲(chǔ)。在存儲(chǔ)之前,沖洗色譜柱,以清除緩沖劑和添加劑。
注意:有關(guān)色譜柱的詳細(xì)保樣與使用說(shuō)明,請(qǐng)參閱色譜柱制造商提供的保樣與使用說(shuō)明。
6、檢查實(shí)驗(yàn)室空氣:
請(qǐng)保持實(shí)驗(yàn)室空氣潔凈。例如實(shí)驗(yàn)室空氣中可能存在鄰苯二甲酸鹽。通過(guò)空氣傳播的鄰苯二甲酸鹽來(lái)源于空調(diào)濾清器,會(huì)污染與空氣接觸的任何溶劑或固體。